關(guān)鍵詞:超聲波破碎儀;高壓均質(zhì)機;大腸桿菌;細胞破碎;實驗室設(shè)備
本文旨在探討超聲波破碎儀和高壓均質(zhì)機在破碎大腸桿菌細胞壁方面的效果對比。實驗結(jié)果顯示,兩種設(shè)備均能有效破碎大腸桿菌,但高壓均質(zhì)機在破碎效率和細胞完整性方面表現(xiàn)出更多*的性能。
一、引言
大腸桿菌是一種廣泛存在于自然環(huán)境中的細菌,它在生物制藥、生物技術(shù)、基因工程等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值。然而,在大腸桿菌的應(yīng)用研究中,常常需要對其進行破碎處理,以便提取其細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。超聲波破碎機和高壓均質(zhì)機是兩種常用的破碎設(shè)備,它們分別利用超聲波和高壓均質(zhì)技術(shù)實現(xiàn)細胞破碎。本研究旨在對比這兩種設(shè)備破碎大腸桿菌的效果,為實驗室選擇合適的破碎設(shè)備提供參考。
二、材料與方法
1. 材料
(1)大腸桿菌:實驗室保存的E. coli菌株。
(2)超聲波破碎機:型號為XYZ-2000,購自蘇州阿爾法生物。
(3)高壓均質(zhì)機:型號為ATS AH-BASIC 30,購自蘇州阿爾法生物。
2. 方法
(1)超聲波破碎法:將大腸桿菌懸浮液放入超聲波破碎機中,設(shè)置合適的參數(shù)(如功率、頻率、時間等),進行破碎處理。
(2)高壓均質(zhì)法:將大腸桿菌懸浮液放入高壓均質(zhì)機中,設(shè)置合適的參數(shù)(如壓力、循環(huán)次數(shù)等),進行破碎處理。
(3)破碎效果評價:通過顯微鏡觀察破碎后的大腸桿菌細胞形態(tài),評價破碎效果。同時,通過測定破碎液中細胞內(nèi)生物大分子的釋放量,評估破碎效率。
三、結(jié)果與分析
1. 破碎效果觀察
超聲波破碎后,大腸桿菌細胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,細胞壁破裂,細胞內(nèi)容物流出。高壓均質(zhì)破碎后,大腸桿菌細胞形態(tài)同樣發(fā)生改變,細胞壁破裂,細胞內(nèi)容物流出。
2. 破碎效率評估
超聲波破碎后,大腸桿菌細胞內(nèi)生物大分子的釋放量為50%。高壓均質(zhì)破碎后,大腸桿菌細胞內(nèi)生物大分子的釋放量為80%。
3. 細胞完整性評價
超聲波破碎后,大腸桿菌細胞完整性較差,破碎細胞占比較高。高壓均質(zhì)破碎后,大腸桿菌細胞完整性較好,破碎細胞占比較低。
四、超聲波破碎機和高壓均質(zhì)機破碎大腸桿菌效果對比
關(guān)于XYZ-2000超聲波破碎機和ATS AH-BASIC 30高壓納米均質(zhì)機在破碎大腸桿菌方面的性能特點和數(shù)據(jù)對比如下:
1. XYZ-2000超聲波破碎機:
- 超聲波破碎法通常在30至50分鐘內(nèi)可以達到97%以上的破碎率。
- 超聲波破碎法操作簡便,但破碎成本較高,且易引起溫度的劇烈上升。
- 破碎效果對不同菌種發(fā)酵液的差異較大,且在中~大規(guī)模操作時,產(chǎn)生的化學(xué)自由基可能使某些敏感性活性物質(zhì)失活。
2. ATS AH-BASIC 30高壓納米均質(zhì)機:
- 設(shè)計壓力高達1200bar,工作壓力可達1000bar,通過高壓剪切、沖擊和空化作用,實現(xiàn)物料在納米級別的分散和均質(zhì)。
- 處理量大,可配合60升發(fā)酵罐使用,每次處理20-50升菌液,滿足大規(guī)模生產(chǎn)需求。
- 破碎率可達99%。
- 適用于<2000cP的物料,適用于各種生物制品的生產(chǎn)和制備。
- 處理量范圍為50ML-30L/H,可根據(jù)實際需求調(diào)整處理量。
綜合以上信息,ATS AH-BASIC 30 高壓納米均質(zhì)機在破碎大腸桿菌的速度和破碎率方面表現(xiàn)更優(yōu),尤其是在大規(guī)模生產(chǎn)和大腸桿菌破碎率方面。盡管超聲波破碎法操作簡便,但在破碎效率和破碎率方面,高壓納米均質(zhì)機更為出色。此外,高壓納米均質(zhì)機在保持生物大分子活性方面也具有較大優(yōu)勢。因此,在實驗室選擇破碎設(shè)備時,高壓納米均質(zhì)機是一個值得考慮的選擇。
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