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使用PCR儀進(jìn)行動物源性成分的檢測方法

 更新時間:2024-04-15 點擊量:641

近年來,食品安全欺詐問題日益突出,尤其是肉制品的摻假現(xiàn)象屢見不鮮。本文簡要說明使用PCR檢測技術(shù)對羊肉產(chǎn)品中若干動物源性成分的檢測方法。

關(guān)鍵詞:基因組DNA樣品;凝膠成像系統(tǒng);PCR

1. 概要

食品安全欺詐問題給消費者的身體健康和合法權(quán)益造成嚴(yán)重威脅。在肉類產(chǎn)業(yè)中,羊肉作為重要的組成部分,其摻假現(xiàn)象越來越普遍。因此,建立一種可靠準(zhǔn)確的羊肉產(chǎn)品動物源性成分檢測方法具有重要意義。

2. 試驗材料

2.1 羊肉樣品:羊肉制品樣本。

2.2 基因組DNA樣品提取試劑盒:包括天根DNA提取試劑盒、DNA純化柱等。

2.3 PCR試劑盒:包括PCR反應(yīng)液、DNA引物等,電泳試劑

2.4 實驗室儀器包括:朗基PCR儀,Tanon凝膠成像儀,水平電泳槽,電泳儀電源,高速離心機(jī)



3. 試驗方法

3.1 樣品的準(zhǔn)備

將購買的羊肉制品樣本切碎,取樣品重量為10g,放入1.5mL離心管中備用。

 

3.2 DNA樣品提取

按照天根基因組DNA樣品提取試劑盒說明書中的操作步驟,從樣品中提取DNA樣品。將提取得到的DNA樣品置于-20°C保存?zhèn)溆谩?/span>

 

3.3 七重PCR檢測

3.3.1 PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備

按照PCR試劑盒說明書中的操作步驟,將所需的試劑按比例混合,制備PCR反應(yīng)液。將PCR反應(yīng)液分裝至PCR試管中,每管20μL。

 

3.3.2 PCR反應(yīng)條件設(shè)置

PCR試管放入朗基PCR儀中,設(shè)置以下PCR反應(yīng)條件:預(yù)變性程序,95°C5分鐘;40個循環(huán):94°C,30秒;56°C,45秒;72°C,45秒;最終延伸程序,72°C10分鐘。

 

3.3.3 凝膠電泳分析

PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳分析,并使用天能凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察和記錄。

 

4. 結(jié)果分析

通過七重PCR檢測技術(shù),對羊肉制品樣本進(jìn)行了動物源性成分的檢測。根據(jù)凝膠電泳結(jié)果,對不同樣本中檢測到的成分進(jìn)行鑒定和定量分析,確定是否存在摻假現(xiàn)象。分析結(jié)果表明,PCR檢測技術(shù)能夠準(zhǔn)確可靠地鑒定羊肉制品樣本中的動物源性成分。

本研究基于PCR檢測技術(shù)建立了一種羊肉產(chǎn)品中動物源性成分的檢測方法。通過實驗證明,該方法能夠準(zhǔn)確鑒定羊肉制品樣本中的成分,并有效地檢測出是否存在摻假現(xiàn)象。這一方法在食品安全監(jiān)管和消費者權(quán)益保護(hù)方面具有重要的應(yīng)用前景。


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