Western Blot實(shí)驗(yàn)是一種常用的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于檢測蛋白質(zhì)在細(xì)胞或組織中的表達(dá)水平。這種實(shí)驗(yàn)需要用到多種實(shí)驗(yàn)室儀器,比如:離心機(jī),電泳儀,轉(zhuǎn)膜儀,酶標(biāo)儀,震蕩搖床等,下面將詳細(xì)介紹這些儀器及其在Western Blot實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用。
1. 電泳儀:電泳儀是Western Blot實(shí)驗(yàn)中常用的儀器之一。它主要用于進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳,將蛋白質(zhì)樣品分離成不同的組分。在電泳過程中,蛋白質(zhì)樣品在電場的作用下,通過凝膠中的孔隙移動,根據(jù)分子大小和電荷的不同,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。
天能系列轉(zhuǎn)移電泳槽-VE-586是一種用于對少量核酸和蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)印的裝置。
該實(shí)驗(yàn)室儀器裝置具有以下性能特點(diǎn):
1. 開啟式轉(zhuǎn)移膠架:裝置采用創(chuàng)新設(shè)計的開啟式轉(zhuǎn)移膠架,可同時轉(zhuǎn)印四塊凝膠。這個設(shè)計使得操作更加方便快捷。
2. 電極架開孔設(shè)計:電泳產(chǎn)熱較少,條帶銳利。電極架采用特殊的開孔設(shè)計,能夠有效降低電泳產(chǎn)熱,保證轉(zhuǎn)印過程中的溫度控制,在轉(zhuǎn)印結(jié)果中獲得清晰而銳利的條帶。
3. 應(yīng)用廣泛:該裝置適用于多種轉(zhuǎn)印技術(shù),包括Westerlot、Northernlot、Southernlot等。它的多功能性使得它可以應(yīng)用于不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)需求。 此外,天能系列轉(zhuǎn)移電泳槽-VE-586還配備了EPS-200/EPS-300/EPS-600電泳儀電源等配套儀器,提供電泳實(shí)驗(yàn)支持。蛋白電泳實(shí)驗(yàn)中可以使用配用的預(yù)制膠,Tanon電泳Precast Gel天能SDS預(yù)制膠-Western blot是一種用于蛋白質(zhì)分離的連續(xù)梯度聚丙烯酰胺變性電泳凝膠。 它具有以下特點(diǎn):
a. 分離范圍廣:該預(yù)制膠適用于分離范圍為4-400 kDa的蛋白質(zhì)樣品。無論是小分子量還是大分子量的蛋白質(zhì)都可以通過該凝膠進(jìn)行有效分離。
b.清晰銳利的條帶:這款預(yù)制膠采用了新型緩沖液配方,可以使得蛋白質(zhì)電泳條帶更加清晰銳利。條帶的清晰度和解析度得到明顯提高,從而提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
c. 穩(wěn)定性優(yōu)良:由于該預(yù)制膠的緩沖液配方經(jīng)過優(yōu)化,能夠?yàn)榈鞍踪|(zhì)電泳提供穩(wěn)定的中性pH緩沖環(huán)境,有效避免了聚丙烯酰胺的水解現(xiàn)象,提高了凝膠的穩(wěn)定性。這種優(yōu)良的穩(wěn)定性能夠保證實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和可靠性。
2. 轉(zhuǎn)膜儀:轉(zhuǎn)膜儀是Western Blot實(shí)驗(yàn)中用于將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或尼龍膜)上的儀器。轉(zhuǎn)膜過程中,蛋白質(zhì)通過電場的作用,從凝膠中轉(zhuǎn)移到膜上,形成固相化的蛋白質(zhì)印跡。這樣,就可以對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的檢測和分析。
M-Blot快速轉(zhuǎn)膜儀是一款高效的蛋白快速轉(zhuǎn)膜系統(tǒng),它基于轉(zhuǎn)膜的原理,結(jié)合了傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)穩(wěn)定、均勻和半干轉(zhuǎn)快速、高效的特點(diǎn),同時避免了傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)耗時費(fèi)力和半干轉(zhuǎn)不均勻穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)。 M-Blot快速轉(zhuǎn)膜儀能夠在10-15分鐘內(nèi)快速高效地實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)從聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上的過程。這個轉(zhuǎn)膜過程是非常重要的,因?yàn)樗菍⒎蛛x的蛋白質(zhì)從凝膠中傳送到膜上,以進(jìn)行后續(xù)的Western blot等分析。M-Blot轉(zhuǎn)膜儀通過優(yōu)化的轉(zhuǎn)膜液和平衡液的使用,確保了蛋白質(zhì)的高效轉(zhuǎn)膜。 該儀器能夠?qū)崿F(xiàn)轉(zhuǎn)膜的均一性和高效性。無論是蛋白質(zhì)的大小或者含量,M-Blot轉(zhuǎn)膜儀都能夠提供較好的轉(zhuǎn)膜效果。它能夠同時轉(zhuǎn)移大小蛋白質(zhì),而且在轉(zhuǎn)膜過程中保持高效的轉(zhuǎn)移率。這意味著您可以獲得更加準(zhǔn)確和可靠的轉(zhuǎn)膜結(jié)果。 另外,M-Blot快速轉(zhuǎn)膜儀的操作非常簡便,使得轉(zhuǎn)膜更加方便快捷。它具備穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)膜均勻、轉(zhuǎn)膜時間短等優(yōu)勢,為用戶提供了全新的轉(zhuǎn)膜體驗(yàn)。不僅可以提高實(shí)驗(yàn)效率,還可以減少實(shí)驗(yàn)時間,為研究人員提供更多的時間進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)。
3. 搖床:搖床在Western Blot實(shí)驗(yàn)中用于孵育和洗滌膜上的蛋白質(zhì)。在孵育過程中,將膜放入含有特異性抗體的溶液中,通過搖床的搖動作用,使抗體與膜上的蛋白質(zhì)充分接觸和反應(yīng)。洗滌過程中,搖床則用于去除未結(jié)合的抗體和非特異性雜質(zhì),提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。知楚ZHSY-50V水浴恒溫振蕩培養(yǎng)箱,采用進(jìn)口伺服電機(jī),故障率低,長使用壽命。采用的三維一體偏三輪驅(qū)動設(shè)計,不僅承載力強(qiáng),同時也能保證平穩(wěn)而高效的運(yùn)行。
4. 酶標(biāo)儀:酶標(biāo)儀是Western Blot實(shí)驗(yàn)中用于檢測膜上蛋白質(zhì)與抗體結(jié)合的儀器。酶標(biāo)儀通過測量標(biāo)記在抗體上的酶與底物反應(yīng)產(chǎn)生的光信號,來定量檢測蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。這種儀器具有高靈敏度和高準(zhǔn)確性,適用于大規(guī)模樣品檢測和分析。
FLUOstar Omega酶標(biāo)儀是一款德國BMG Labtech公司生產(chǎn)的多功能酶標(biāo)儀,具備紫外/可見光吸收光譜、熒光強(qiáng)度(包括FRET)、時間分辨熒光(包括DELFIA®)、TR-FRET(包括HTRF®和LanthaScreenTM)、AlphaScreen® / AlphaLISA®以及發(fā)光(包括快速發(fā)光和持續(xù)發(fā)光)等多個獨(dú)立檢測模塊。該酶標(biāo)儀還特別支持BRET功能,能夠?qū)崿F(xiàn)共振能量轉(zhuǎn)移檢測,為用戶提供高效而準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
5. 離心機(jī):離心機(jī)在Western Blot實(shí)驗(yàn)中用于分離和純化蛋白質(zhì)樣品。在離心過程中,蛋白質(zhì)樣品在離心力的作用下,根據(jù)密度和沉降速度的不同,實(shí)現(xiàn)組分的分離。離心機(jī)對于去除樣品中的雜質(zhì)和提取特定蛋白質(zhì)具有重要作用。
這款恒爾2515離心機(jī)常用在各種分子生物學(xué),蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)中,它具有以下特點(diǎn):
- 大轉(zhuǎn)子容量:可容納5個2.0ml離心管或6個15/25/50ml離心管。
-相對離心力:25155xg (15000rpm),可實(shí)現(xiàn)高速離心。
- 可適配16款不同轉(zhuǎn)子,提供更大的離心容量和多樣樣品適應(yīng)性。
- 離心機(jī)上蓋采用快速鎖緊技術(shù),方便快速開關(guān)蓋。
- 旋鈕加觸摸式調(diào)節(jié)參數(shù),操作簡便。
- 瞬時離心按鍵,能夠快速啟動離心過程。
- 軟剎車功能,可防止對敏感樣品的損害。
- 自動轉(zhuǎn)子失衡識別功能,提高離心安全性。
- 自動識別16款轉(zhuǎn)子并進(jìn)行限速控制,保證離心過程的穩(wěn)定性。
- 可存儲8個常用程序,方便用戶快速調(diào)取。
- 2個記憶功能快捷程序按鍵,可快速調(diào)取常用程序。
- 緊急開蓋功能,適用于突發(fā)實(shí)驗(yàn)事故,如斷電等情況。
- 提供三種定時功能:定時開啟、定時關(guān)閉和計時。
- 門鎖開關(guān)狀態(tài)顯示及糾錯功能,提供報警及停機(jī)功能。
- 可通過10檔加減速度曲線控制離心過程。
- 溫度范圍為-20°C至40°C,可適應(yīng)不同的離心需要。
- 持續(xù)制冷功能,離心結(jié)束后仍可保持設(shè)定溫度。
- 快速預(yù)冷功能,可快速預(yù)冷離心腔體。
- 自動待機(jī)功能,可選1、2、4或8小時,在停止使用后自動進(jìn)入待機(jī)模式,降低能耗,延長壓縮機(jī)使用壽命。
- 內(nèi)置冷凝水槽,避免冷凝水積聚,防止腐蝕。
除了以上幾種主要儀器外,Western Blot實(shí)驗(yàn)還可能用到其他一些輔助設(shè)備,如微量移液器、水浴鍋、冰箱等。這些實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備在實(shí)驗(yàn)過程中起著重要 作用,為實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行提供了有力保障。