移液器的校準,意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。移液器校準是指通過校對調(diào)整移液器,使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準期間,可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的 10%(以較高者為準)檢查性能。當您購買移液器時,您應該選擇一款能夠針對不同溫度和各種粘性液體進行重新校準和調(diào)整的移液器。
在質(zhì)量體系中校準移液器
質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準的主要目標是確保以預期的精度進行測量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格,而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準實質(zhì)是根據(jù)*標準(DIN 12650 或 ISO 8655)設置限制。根據(jù)質(zhì)量體系中校準移液器的程序如下:
一、設備要求和測試條件
1.平衡度測定:
天平的刻度值應根據(jù)所選的移液器體積來選擇。
注意:使用已知砝碼定期檢查您的天平校準情況。
2.測試液體要求:
蒸餾水或去離子水,“3 級",符合 ISO 3696。測試水在校準前至少在校準室中放置 2 小時,以達到與測試室條件的平衡。測試室條件要求:
3.測試在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 溫度下在無氣流的房間中進行。建議相對濕度在 45% 以上。尤其是體積在 50 vl 以下的情況下,空氣濕度應盡可能高,以減少蒸發(fā)損失的影響。
- 測試室內(nèi)的移液器、水和空氣應處于相同溫度。
- 新吸頭應預先潤濕 1 至 3 次以提高準確性。
- 始終從水箱中吸取水,不要從天平中取回水。
- 根據(jù)使用頻率和應用情況定期檢查校準,但至少每年一次。如果每天使用,建議間隔三個月。
1.收到需要校準的移液器后,每個移液器都小心地打開包裝并檢查是否有任何可見的損壞跡象。發(fā)現(xiàn)的任何可見損壞都會立即報告給客戶。客戶將被告知損壞是否可以修復以及將收取哪些額外費用??蛻魧l(fā)出新的工作訂單以支付維修費用。
2.對每個移液器進行輻射污染掃描。發(fā)現(xiàn)的任何輻射污染都會立即報告給客戶,并且移液器將被拒絕校準。
3.所有客戶的移液器都經(jīng)過計數(shù),并與提供的工作訂單上報告的數(shù)量進行比較。任何數(shù)量差異都會立即報告給客戶。客戶將有機會找到任何缺失的數(shù)量,否則工作訂單將需要修改并由客戶簽署。
4.每個工作訂單將被放置在一個單獨的內(nèi)部存儲箱中,直到計劃進行校準。
為每個工作訂單分配單獨的工作 ID 號。
6.檢查客戶信息與存檔信息的任何差異,并在需要時進行更正。所有移液器都在分配的作業(yè) ID 號下輸入 Cal Lab 數(shù)據(jù)庫,并為每個儀器分配 ID 號。
三、預校準程序
· 在校準和任何移液器調(diào)整之前獲得和記錄的數(shù)據(jù)也將被記錄下來。
· 每個移液器都將在制造商定的MIN和MAX量程點進行測試。每個點進行十次測試。
· 作為預防性維護的一部分,每個移液器都根據(jù)制造商的圖表進行拆卸,并用適當?shù)幕瘜W溶液清潔。
· 所有零件都經(jīng)過仔細檢查,活塞在大多數(shù)情況下都經(jīng)過拋光,活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更換。完成后,將根據(jù)制造商的圖表和程序重新組裝每個移液器。再次目視檢查移液器的功能是否正常。
四、移液器校準步驟
1.在移液器校準開始時,每個移液器在進行任何調(diào)整之前都會預先檢查 3 次。如果移液器失敗,將執(zhí)行適當?shù)男收{(diào)整。校正后,每臺儀器將在低和高量程點進行校準,每個測試點進行10 次測試。
2.校準數(shù)據(jù)將被記錄并報告在校準報告中。
3.為每個移液器發(fā)布校準報告以及整個工作的校準摘要。適當?shù)募夹g(shù)人員簽署報告。
創(chuàng)建校準標簽并貼在每個移液器上。所有移液器都經(jīng)過交叉核對客戶提供的文書工作以及實驗室內(nèi)創(chuàng)建的文檔。
4.QC 主管檢查隨機選擇的移液器的整體性能。
5.如果檢測到任何錯誤,則將整個 Job 送回以進行重新檢查。
6.QC 主管批準工作,移液器經(jīng)過仔細包裝并隨附所有校準文檔交付給客戶。
移液器誤差的來源:
l 揮發(fā)性液體蒸發(fā)。在飽和空氣中使用。
l 高密度液體下沉。改變技術(shù)。
l 粘性液體會粘在末端。改變技術(shù)。
l 親水吸頭將保留液體。預濕筆尖。
l 浸入式吸頭攜帶液體。浸入 2-3 毫米。
l 有角度的移液器會吸收更多的液體。保持垂直。
l 表面張力會降低精度。改變技術(shù)。
l 冷熱液體。在室溫下吸取液體。
l 人的因素。練習和觀察技術(shù)。
五、移液器校準計算公式:
質(zhì)量到體積的轉(zhuǎn)換
V = (w + e) x Z
V = 體積 (vl)
w = 重量(毫克)
e = 蒸發(fā)損失 (mg)
Z = mg/vl 轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換系數(shù)
注意:蒸發(fā)損失可能在體積小時明顯。要確定質(zhì)量損失,請將水分配到稱量容器中,記下讀數(shù)并開始用秒表計時。檢查讀數(shù)在 5 秒內(nèi)下降了多少。將此與移液時間進行比較。通常,移液時間可能為 5 秒,質(zhì)量損失高達 2 mg。如果在容器上使用蒸發(fā)阱或蓋子,則無需進行蒸發(fā)校正。
換算系數(shù) Z 用于計算在測試溫度和壓力下懸浮在空氣中的水的密度。請參見第 15 頁的轉(zhuǎn)換表 1。
準確度(系統(tǒng)誤差)
準確度是移液器的分配體積和選定體積之間的差異。
精度在移液器校準證書上以相對值表示:
精密度(隨機誤差)
精密度是指移液的可重復性。它表示為標準偏差 (s) 或變異系數(shù) (cv)。除了移液器的特性外,實驗室實踐和用戶體驗是影響精度的主要因素。
根據(jù) DIN 12650 的誤差(F 值)
DIN 標準沒有給出準確度和精密度的單獨限制,而是使用組合誤差限制:F 值。
F = | 一個 | + 2 xs
計算相對 F 值:
F% = | % | + 2 x 數(shù)量
表 2 顯示了根據(jù) DIN 12650 標準對單通道空氣置換移液器的誤差限制。對于多道移液器,這些限制加倍。對于可變?nèi)萘恳埔浩鳎瑯朔Q容量是最大容量。標稱體積的絕對 vl 限制適用于整個體積范圍內(nèi)的每個選定體積。
例如,對于 20-200UL的移液槍,每個選定體積的誤差限制為2.0ul。如果移液器的標稱體積介于表中的數(shù)值之間,則使用接近體積的相對誤差限值 F%。如果標稱體積正好在表 2 中的兩個體積之間,則使用較低體積的相對誤差限值 F%。
移液器精密度和準確度的評估
無差錯移液需要精密度和準確度。許多因素會影響這些規(guī)格,它們是評估移液器性能的主要定量參數(shù)。
例如當設置體積為 20 vl 時:準確但不精確:平均體積是正確(設定)體積,但單獨移液與設定體積不同。
精確,但不準確:單獨移液之間沒有變化,但平均體積與設定體積不同。
準確和精確:平均體積是設定的體積,不同移液之間沒有差異。
1. 移液器垂直,吸頭浸入液體約 1 cm。
2. 移液器垂直,吸頭浸入液體約 3 cm。
3. 30×40度角移液器;末端浸入液體中約 3-4 厘米。
梅特勒-瑞寧作為專業(yè)的移液器生產(chǎn)供應商,為生物科學實驗室提供移液解決方案,除了移液器供應和專業(yè)的移液器 校準 、售后服務,產(chǎn)品也在不斷升級推新,多年來與蘇州阿爾法生物合作密切,所開發(fā)的 LTS輕觸式去吸頭移液器符合人體力學工程設計,在保證移液器精確度的同時,也減輕了重復操作移液器所帶來的疲勞,有效提升液體處理效率。